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本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取血液凝块中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。本试剂盒适合100μL～1mL的血凝块样品。

• 简单快速：1小时内即可完成提取流程，获得高质量的gDNA。
  
• 纯度高：获得的DNA纯度较高，可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。

• 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇。
  
• 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小、提取量下降。
  
• 若缓冲液GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
  
• 所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。
  
• 对于1mL以上血凝块基因组DNA提取，请选购中量血液基因组DNA提取试剂盒和液化柱CX2配合进行提取。

• 处理血凝块
  
  • 取血凝块至液化柱CX1中，10000rpm(~11500×g)，离心1min，收集滤液进行下一步实验(若血凝块量大可分次离心收集滤液)。
    
  • 取滤液加入1～2.5倍体积的细胞裂解液CL，颠倒混匀，10000rpm(~11500×g)离心1min，吸去上清，留下细胞核沉淀（如果裂解不彻底，可重复步骤b一次），向收集的细胞核沉淀中加入200μL缓冲液GS，振荡至彻底混匀。
    注意：如果需要切除RNA，可加入选购的4μL RNase A(100mg/mL)，振荡15sec，室温放置5min。
• 加入20μL Proteinase K溶液，混匀。
  
• 加入300μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，56℃放置10min，期间颠倒混匀数次，溶液应变澄清（如果溶液未彻底变澄清，请延长裂解时间至溶液澄清为止）。
  
• 加入300μL无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀。
  
• 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱CB3放入收集管中）,12000rpm(~13400×g)离心30sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
  
• 向吸附柱CB3中加入500μL缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(~13400×g)离心30sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
  
• 向吸附柱CB3中加入600μL漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm(~13400×g)离心30sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
  
• 重复步骤7。
  
• 将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm(~13400×g)离心2min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残留的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶切反应实验(酶切、PCR等)。
  
• 将吸附柱CB3转入1.5mL离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液TB，室温放置2～5min，12000rpm(~13400×g)离心2min，将溶液收集到离心管中。
  注意：洗脱缓冲液体积不应少于50μL，体积过小影响回收效率。为增加gDNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2min，12000rpm(~13400×g)离心2min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O作为洗脱液应保证其pH值在7.0～8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率。得到的DNA应保存在-20℃，以防DNA降解。

• 得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
  
• DNA应在OD₂₆₀处有显著吸收峰，OD₂₆₀值为1相当于大约50μg/mL双链DNA、40μg/mL单链DNA。
  
• OD₂₆₀/OD₂₈₀比值应为1.7～1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。